Меню Рубрики
  • Продукты для усиление иммунитета

    Обзор исследований: 9 продуктов, которые повышают иммунитет человека Иммунная система – главный защитник организма от воздействия любых чужеродных агентов (бактерии, вирусы, грибки, токсические вещества). К сожалению, при недостатке витаминов и некоторых элементов в рационе, злоупотреблении вредными привычками, неподвижном образе жизни, работа слаженных механизмов иммунитета сбивается. Сбои в работе иммунной системы

  • Аутогемотерапия для иммунитета отзывы

    Методика "Аутогемотерапия": отзывы, описание и противопоказания Многим современным людям не понаслышке хорошо известна проблема акне и всяческих высыпаний, которые портят внешний вид кожи. Конечно же, каждый человек старается бороться с этим неприятным недугом по-своему, пробуя различные методики и лекарства. В последние годы все большей популярностью стала пользоваться аутогемотерапия. Несмотря на

  • Аутоантитела к ревматоидному фактору

    Ревматоидный фактор: норма, повышен и как его можно снизить Ревматоидный фактор – это антитела в крови, которые обычно сигнализируют о развитии аутоиммунного нарушения в организме в ответ на воздействие какого-либо агента, например, бактерии. Хотя анализ на ревматоидный фактор полезен при диагностике ревматоидного артрита и контроля течения заболевания, этот анализ также

  • Ядерные лимфоциты в крови

    Причины появления реактивных лимфоцитов, о чем говорит повышение их уровня в крови? Реактивные лимфоциты способны повышаться при наличии серьезных патологий. Большинство людей уверены, что их повышение связано с тем, что в организме разрастается опухоль, однако это неверно. Такие тельца указывают на аллергию или развитие инфекционного заболевания. Лимфоциты – подвид лейкоцитов,

  • Ядро лимфоцита в мазке крови

    Лейкоцитарная формула (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений) Лейкоцитарная формула – процентное соотношение различных форм лейкоцитов в сыворотке крови и подсчет их числа в единице объема. При наличии атипичных форм клеток проводится исследование крови под микроскопом. В отличие от эритроцитов, популяция которых является однородной, лейкоциты делятся на 5

  • Эритроциты и лимфоциты в крови ниже нормы

    Лимфоциты в крови: повышены, понижены, в норме Нередко, получив результаты анализа крови, мы можем прочитать там заключение врача о том, что повышены лимфоциты в крови. Что это значит, опасно ли это заболевание, и можно ли его вылечить? Что такое лимфоциты? Лимфоцитами называется определенная категория клеток крови. Она очень важна для

Холестерин и иммунные клетки

Какую роль играет холестерин в организме человека?

Некоторые молекулы, которые поступают в организм извне или синтезируются внутри него, обладают полифункциональностью. Функции холестерина заключаются в активации стероидных гормонов, биосинтезе холекальциферола, пищеварении. Холестериновый обмен влияет на метаболизм всех клеток, органов и тканей организма. Всосавшись из желудочно-кишечного тракта или образовавшись в печени, молекулы холестерола, связанные с липопротеидными комплексами, поступают на следующие этапы биотрансформации. Выведение этих молекул также производится в составе липидов низкой и очень низкой плотности.

Что такое холестерин?

Строение холестерина изучает природоведческая наука биохимия. Формула его обозначается как С27Н46О. Это обозначает, что холестерол содержит 27 атомов углерода, и 46 — водорода.

Основа молекулы кристаллическая. В составе липидов высокой плотности она поступает из периферических тканей в печень. Здесь активируются фосфолипиды, производящие дальнейший биосинтез вещества. Примитивная схема дальнейшего метаболизма холестериновых молекул выглядит следующим образом:

  • Производные холестерола поступают в кровоток, где с ними происходит окисное гидроксилирование. В результате этого процесса отщепляется боковая углеводная цепь. Так формируются гормональные вещества.
  • Обмен холестерина в организме человека продолжается в виде синтеза холекальциферола. Этот витамин идет на построение опорно-двигательного аппарата человека.
  • Лишний холестерол, поступившей с животной пищей или чрезмерно синтезирующийся гепатоцитами, накапливается в сосудистых стенках. Это очень плохо для здоровья, поскольку в результате избытка холестериновых молекул формируются атеросклеротические бляшки.

Вернуться к оглавлению

Функции холестериновых структур

Биологическая роль холестерина в организме человека следующая:

  • Гидролиз эфиров. Под ним подразумевается расщепление холестеринового вещества под воздействием фермента холестеролэстеразы. Обратное образование эфиров производится в просвете толстого кишечника под влиянием местной микрофлоры и ее энзимов.
  • Метаболизм. Холестерол принимает активное участие в обмене веществ, включаясь в биохимические процессы посредством встраивания в гормоны надпочечников или половых гонад. Среди его производных выделяют холекальциферол — витамин D, способный синтезироваться только под влиянием солнечного излучения.
  • Пищеварение. Холестерол выполняет расщепление сложных компонентов животной пищи до более простых для всасывания. Он выполняет в эту функцию в составе желчных кислот, пребывая в двенадцатиперстной кишке.

Вернуться к оглавлению

Влияние на иммунитет

Значение холестерина в правильном функционировании иммунной системы бесценно. Он влияет на реакцию клеточного и гуморального звеньев иммунитета на химические и биологические агенты, атакующие клетки организма. Ученые Копенгагенского университета сделали открытие, что слишком высокая или критически низкая концентрация в крови липопротеидов высокой плотности ведет к иммунодефицитам. А вот баланс холестериновых структур помогает укрепить иммунную систему и сделать организм резистентным ко многим вирусными и бактериальным агентам.

Работа органов

Наиболее хорошо изучено влияние холестерина на сердечно-сосудистую систему. Низкий его уровень никак не отображается на функционировании сердца и сосудов. А вот высокий, наоборот, провоцирует закупорки артерий, вен и капилляров атеросклеротическими бляшками. Последние развиваются в интиме — внутренней выстилке сосудистых стенок. «Хороший» же холестерол помогает органам желудочно-кишечного тракта. Он включается в состав желчных кислот, вместе с ними поступая в желчь, вытекающую через Фатеров сосочек в двенадцатиперстную кишку, где производится переваривание жиров. Все эти процессы регулируются печенью, которая принимает главенствующую роль в холестериновом обмене.

Атеросклеротические процессы, поражают все органы и системы, включая головной мозг, коронарные сосуды сердца, почки, органы дыхания и кожные покровы. Поэтому знание функций холестерола позволяет проводить профилактику атерогенеза.

Работа мозга

Еще одна важная роль холестерола в организме — его воздействие на нервную ткань. Он встраивается в клеточные оболочки нейронов, а также является основным функциональным компонентом миелиновой оболочки. Последняя играет роль муфты для нервных волокон и корешков. Именно благодаря ей импульсы от ядра клеток передаются ко всем участкам организма человека. Но повышенные концентрации холестероловых веществ часто приводят к тяжелой патологии — инсульту. Острое нарушение мозгового кровообращения характеризуется закупоркой какого-либо сосуда атеросклеротической бляшкой с дальнейшим омертвением участка коры головного мозга.

Метаболизм и холестериновые молекулы

Обмен холестерина непосредственно связан со всеми метаболическими процессами в организме. Он затрагивает прежде всего эндокринную систему. Стероидные гормоны, синтезируемые надпочечниковыми железами, женскими и мужскими гонадами, содержат в себе холестерол. Поэтому последний играет роль стимулятора образования вторичных половых признаков у мальчиков и девочек, корректора уровня глюкозы в кровеносном русле, ингибитора некоторых ферментов, а также усилителя процессов синтеза и расщепления.

Строение клеточных мембран

Химия утверждает, что холестериновые структуры содержатся в стенках всех клеток организма животных. Кроме холестерола, компонентом каждой клеточной мембраны является фосфолипид. Эта структура позволяет клетке функционировать, как открытая система, поглощающая необходимые вещества и выделяющая наружу продукты обмена. Холестероловые структуры в составе клетки интегрированы между цепями жирных кислот. Подобное строение мембран делает их прочными и способными регулировать ионный обмен.

источник

Холестерин и иммунные клетки

Многие годы безуспешно боретесь с ХОЛЕСТЕРИНОМ?

Глава Института: «Вы будете поражены, насколько просто можно снизить холестерин просто принимая каждый день.

Гиперхолестеринемия — один из вариантов нарушения метаболизма жиров (липидного обмена), сопровождающийся лабораторно подтвержденным анализом с повышением концентрации этого вещества в крови до 5,2 ммоль/л и больше. В Международной статистической классификации болезней МКБ-10 к этому состоянию относятся как к «чистому» холестериновому росту, не связанному с другими распространенными заболеваниями.

Согласно присвоенному коду E78.0, гиперхолестеринемия входит в состав различных нарушений обмена веществ и питания, но не является болезнью.

Для снижения холестерина наши читатели успешно используют Aterol. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

ХХ век отличился «обвинением» одной из холестериновых фракций (низкоплотных липопротеинов) в главной причине атеросклероза — бича человечества, вызывающего все основные тяжелые болезни сердца и сосудов с высокой смертностью.

Соответственно, фармацевтическая отрасль и диетотерапия подстроились к теме и перевели производство и рекламную кампанию на медикаменты и продукты, снижающие уровень холестерина. К настоящему времени массовая истерия закончилась, поскольку доказана ведущая роль вирусного повреждения сосудистой стенки перед формированием атеросклеротического пятна.

В проблеме профилактики гиперхолестеринемии большое внимание уделяется противовирусной защите, а роль особенного меню в питании отошла на второе место.

В защиту холестерина приводятся доводы о его непременном участии в функциях:

  • строительства клеточной оболочки;
  • синтеза витамина D;
  • производства гормонов надпочечников и половых желез;
  • защиты от стресса.

23% холестерина находится в ткани мозга, остальной запас расположен в печени. Именно она первой страдает от различных диет при гиперхолестеринемии. В питании населения северной части Индии употребляются в 17 раз больше богатых холестерином продуктов, чем в южных районах. При этом обследование выявило, что атеросклероз венечных артерий у северян в 7 раз ниже.

Установлено, что только 25% животных жиров, превращающихся в холестерин, поступают с пищей. Гиперхолестеринемия возможна в связи с:

  • повышенным производством в печени (продукционный вид метаболизма);
  • нарушенным выделением (редукционный вид);
  • избыточным поступлением с продуктами питания (проблема занимает не ведущее, а третье место).

Биохимические изменения обмена жиров регистрируют повышенную концентрацию холестерина почти у каждого третьего жителя (в разных странах показатели отличаются).

Изучение механизма происхождения гиперхолестеринемии позволило разделить ее на 3 вида:

  • первичную — независимую от каких-либо уже установленных заболеваний;
  • вторичную — последствие обменных липидных перестроек, вызванное определенной патологией;
  • алиментарную — связанную с «перееданием» животных жиров.

Другое название первичных изменений — семейная гиперхолестеринемия.

При семейной гиперхолестеринемии у лиц с близкородственными связями обнаружены генетические дефекты трех видов:

  • отсутствуют рецепторы, связывающие и регулирующие уровень холестерина, обнаруживается дефект в белковой части липопротеинов;
  • активность рецепторов сохранена, но она в 10 раз ниже нормальных генов, отсутствуют ферменты для транспортировки молекул низкоплотных липопротеинов;
  • липопротеины низкой плотности связываются, но не переносятся внутрь клетки.

Лица с гомозиготным путем наследования имеют все три варианта нарушений, а при гетерозиготном часть генов сохраняет нормальные способности, поэтому в клетки поступает холестерин, но интенсивность слаба.

У гомозиготов дефект распространяется на печеночные клетки. Они теряют способность перерабатывать жиры, активизируют интенсивность синтеза. В результате происходит блокирование процессов усвоения с последующим накоплением холестерина в плазме.

На излишки липопротеинов с низкой плотностью «нападают» и пытаются их переработать иммунные клетки-чистильщики.

Но часть холестерина остается недоступной для «чистильщиков», она успевает проникнуть внутрь артериальных стенок. Поэтому создается высокий риск атеросклеротического поражения.

В отличие от других видов липидемии семейная гиперхолестеринемия:

  • сопровождается более высоким уровнем холестерина в плазме, превышающем норму в 6–8 раз (гетерозиготных наследников этот признак не касается);
  • охватывает нескольких членов семьи, включая детей;
  • проявляется ксантомами на сухожилиях.

Если одновременно повышается концентрация триглицеридов в плазме, то болезнь невозможно отличить от других видов. Одним из запоздалых и опасных нарушений служат острые инфаркты миокарда у лиц, не достигших 30-летнего возраста.

Причины гиперхолестеринемии при вторичной форме зависят от метаболических поломок в организме, связанных с хроническими заболеваниями. Подобные изменения выявлены при:

  • гипотиреозе (сниженной функции щитовидки в результате воспаления, как последствие операции, врожденных аномалий);
  • сахарном диабете (страдает углеводный обмен, но синтезируются лишние жиры);
  • заболеваниях печени с нарушенным оттоком желчи (желчекаменная болезнь, опухоль);
  • под действием медикаментов (диуретики, β-блокаторы, иммунодепрессанты способны нарушать обмен липопротеинов).

Алиментарная форма — единственная доказанная связь с особенностями питания. При этом принято различать:

  • преходящую гиперлипидемию (непостоянную), возникающую сразу после или на следующие сутки после однократного переедания жирной пищи;
  • постоянную — определяется типом питания с употреблением значительного количества животных жиров.

Симптомы гиперхолестеринемии имеют мало внешних признаков. Они проявляются в запущенной стадии при длительном существовании сбоя метаболизма липидов. Состояние на раннем этапе диагностируется по лабораторным показателям.

У пациента с нарушенным жировым метаболизмом при осмотре можно заметить:

  • ксантомы — небольшие узелки под кожей плотной консистенции, «припаянные» к сухожилиям, чаще расположены на мышцах-разгибателях пальцев рук, ног и в области ахилловой связки;
  • ксантелазмы — желтые плоские мелкие узелки на веках, похожие на «зерна»;
  • на роговице глаз видна липоидная дуга в виде серо-белого ободка по краям.

Появление ксантом и липоидной дуги на роговице в молодом возрасте указывает на наследственный тип гиперхолестеринемии.

При атеросклеротическом повреждении сосудов клиническая симптоматика будет говорить о степени нарушения кровообращения, что иногда совершенно не соотносится с наличием гиперхолестеринемии.

В выявлении гиперхолестеринемии осмотр врача не играет решающей роли. Подтверждение диагноза получают с помощью биохимических исследований.

Жировой обмен отражает липидограмма. В анализ входят показатели:

  • холестерина;
  • липопротеинов низкой и очень низкой плотности;
  • триглицеридов;
  • липопротеинов высокой плотности.

Первые 3 показателя объединяются термином «атерогенные», поскольку именно от них зависит риск построения атеросклеротических бляшек. Поэтому для практической оценки определяют коэффициент путем деления суммы трех показателей на содержание высокоплотных липопротеинов. Риск считается высоким при значении 3 и более.

Спор на тему о том, какой анализ более информативен, взятый натощак или после еды, решили рекомендации экспертов восьми европейских стран и США. Они требуют соблюдать следующую схему:

  • забор крови на липидограмму проводить без предварительного голодания (победило мнение о более важном влиянии уровня холестерина в течение дня, чем натощак);
  • если выявлена концентрация триглицеридов выше 5 ммоль/л, то анализ следует повторить натощак;
  • чрезвычайно высокий уровень изменений должен специально маркироваться в результатах анализа для обращения внимания врача.

Предварительно проведено обследование более 300 тыс. пациентов в Канаде, США и Дании. Они доказали отсутствие существенной разницы в концентрации липопротеинов в ответ на прием привычной для пациентов пищи.

В Дании аналогичный стандарт обследования принят с 2009 года. Его сторонники считают, что таким образом можно привлечь к раннему выявлению и лечению гиперхолестеринемии больше людей, расширить возможности профилактики.

Для гетерозиготной семейной гиперхолестеринемии характерно изолированное повышение концентрации холестерина (фракции низкоплотных липопротеинов) на фоне нормального уровня триглицеридов.

При подозрении на первичную форму рекомендуется обследование родственников в генетической лаборатории.

Иммунологический анализ по определению специфических антител требуется для определения реакции на цитомегаловирус и хламидийную инфекцию. Эти микроорганизмы считаются наиболее частой причиной атеросклероза и позволяют подтвердить вторичную гиперхолестеринемию.

С этой же целью в диагностике используют определение уровня сахара, общего белка, креатинина (как продукта распада белка).

Лечение гиперхолестеринемии зависит от определения уровня и степени риска заболеваний сердца и сосудов. При умеренной гиперхолестеринемии рекомендуются немедикаментозные методы. Они включают:

  • нормализацию веса при ожирении;
  • физические нагрузки с учетом сопутствующих заболеваний и возраста больного;
  • в течение 4–6 месяцев рекомендуется придерживаться определенного типа питания;
  • прекращение курения.

Диета при гиперхолестеринемии категорически исключает алкоголь, ограничивает употребление животных жиров.

Из меню необходимо исключить сало, жирные сорта мяса, копчености, колбасу, плавленые сыры, сметану, молоко и творог повышенной жирности, сладости, кондитерские изделия с кремом.

Продуктовый набор меняется на нежирное мясо и рыбу, овощные блюда, фрукты и зелень, твердые виды сыров, молочные продукты с низкой жирностью, каши, исключая манную и овсянку в связи с высокой калорийностью, хлеб с отрубями.

Народное лечение тоже включает некоторые диетические свойства овощей, фруктовых соков, трав, меда. Примером широких возможностей «чистки» печени от излишнего холестерина служат:

  • липовый цвет,
  • корни одуванчика,
  • льняное семя,
  • расторопша.

Эти растения можно принимать в порошкообразном виде и просто жевать их до еды или заваривать как чай и пить отвары.

Чеснок, лимон и мед — отличное сочетание для повышения тонуса сосудов. Знахари обещают понижение уровня холестерина.

Зеленый чай с мятой и мелиссой используют как старинное народное средство для перевозбужденной нервной системы, укрепления иммунитета.

Лекарственные препараты используются в лечебных целях и для профилактики. Выбор нужного медикамента проводит врач на основании имеющихся данных обследования и информации о сопутствующих заболеваниях. В аптечной сети можно найти противохолестериновые средства нескольких видов.

Статины — долгое время считались лучшими препаратами, наиболее сильным действием обладает Розувастатин. Средства способны разрушать липидные комплексы, подавляют их синтез в печени. В настоящее время появился опыт негативных влияний статинов на организм:

Для снижения холестерина наши читатели успешно используют Aterol. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Препараты этого ряда противопоказаны при болезнях печени и в некротическую стадию инфаркта.

Группа средств, затрудняющих всасывание жиров в кишечнике, малоэффективна, поскольку может воздействовать только на холестерин, содержащийся в продуктах питания.

Ионно-обменные смолы — связывают желчные кислоты (включают холестерин), выводят их из организма. Способны вызывать нарушение стула, изменять вкусовые ощущения.

Фибраты — действуют только на триглицериды, повышают концентрацию липопротеидов высокой плотности, разрешается совместное применение со статинами.

Полиненасыщенные Омега-3 кислоты — получены из мышечной ткани рыб. Понижают триглицериды в плазме.

Особенно трудно снизить уровень холестерина у пациентов с первичными формами. Для этого прибегают к:

  • методу иммуносорбции липопротеинов;
  • гемосорбции;
  • плазмофильтрации.

Для облегчения состояния пациентов методом выбора является пересадка печени. Перспективные исследования по воздействию на геном человека пока в стадии научной разработки.

Как распорядится организм холестериновыми производными, заранее предположить невозможно.

  • коэффициентом атерогенности по биохимическому анализу на липиды;
  • скоростью возникновения атеросклеротических изменений по контрольному УЗИ сонных артерий, ЭКГ-признакам;
  • локализацией бляшек в сосудах сердца и мозга;
  • возможностью повлиять на гиперхолестеринемию без медикаментов.

Нельзя считать повышенный уровень жиров безобидным отклонением. Следует выявить его причину и позаботиться о предупреждении негативных последствий.

Читайте также:  Общий холестерин более 7

Что такое триглицериды в крови?

Первые школьные уроки об устройстве человеческого организма знакомят с главными «обитателями крови: красные клетки – эритроциты (Er, RBC), определяющие цвет за счет железа, в них содержащегося, и белые (лейкоциты), присутствие которых на глаз не видно, поскольку на окраску они не влияют.

Эритроциты человека, в отличие от животных, не имеют ядра, но прежде чем потерять его, они должны пройти путь от клетки-эритробласта, где только начинается синтез гемоглобина, достигнуть последней ядерной стадии — нормобласта, накапливающего гемоглобин, и превратиться в зрелую безъядерную клетку, основным компонентом которой является красный кровяной пигмент.

Чего только люди не делали с эритроцитами, изучая их свойства: и вокруг земного шара пытались их обернуть (получилось 4 раза), и в монетные столбики укладывать (52 тысячи километров), и площадь эритроцитов сопоставлять с площадью поверхности тела человека (эритроциты превзошли все ожидания, их площадь оказалась выше в 1,5 тысячи раз).

Еще одна важная особенность эритроцитов заключается в их двояковогнутой форме, но если бы они были шарообразными, то общая площадь их поверхности была бы меньше на 20% настоящей. Однако способности эритроцитов заключаются не только в величине их общей площади. Благодаря двояковогнутой дисковидной форме:

  1. Эритроциты способны переносить больше кислорода и углекислого газа;
  2. Проявлять пластичность и свободно проходить через узкие отверстия и изогнутые капиллярные сосуды, то есть, для молодых полноценных клеток в кровяном русле практически нет препятствий. Способность проникать в самые отдаленные уголки организма теряется с возрастом эритроцитов, а также при их патологических состояниях, когда изменяется их форма и размер. Например, сфероциты, серповидные, гири и груши (пойкилоцитоз), не обладают такой высокой пластичностью, не могут пролезать в узкие капилляры макроциты, а тем более, мегалоциты (анизоцитоз), поэтому и задачи свои измененные клетки выполняют не столь безупречно.

Химический состав Er представлен в большей степени водой (60%) и сухим остатком (40%), в котором 90 — 95% занимает красный пигмент крови – гемоглобин, а остальные 5 — 10% распределены между липидами (холестерин, лецитин, кефалин), белками, углеводами, солями (калий, натрий, медь, железо, цинк) и, конечно, ферментами (карбоангидраза, холинэстераза, гликолитические и пр.).

Клеточные структуры, которые мы привыкли отмечать в других клетках (ядро, хромосомы, вакуоли), у Er отсутствуют за ненадобностью. Живут эритроциты до 3 – 3,5 месяцев, затем состариваются и с помощью эритропоэтических факторов, которые выделяются при разрушении клетки, подают команду, что их пора заменить новыми – молодыми и здоровыми.

Начало свое эритроцит берет от предшественников, которые, в свою очередь, происходят от стволовой клетки. Воспроизводятся красные кровяные тельца , если в организме все нормально, в костном мозге плоских костей (череп, позвоночник, грудина, ребра, тазовые кости). В случаях, когда по каким-либо причинам костный мозг не может их производить (поражение опухолью), эритроциты «вспоминают», что во внутриутробном развитии этим занимались другие органы (печень, вилочковая железа, селезенка) и заставляют организм начать эритропоэз в забытых местах.

Общее количество эритроцитов, содержащееся в организме в целом, и концентрация красных клеток, курсирующих по кровяному руслу – понятия разные. В общее число входят клетки, которые еще пока не покинули костный мозг, ушли в депо на случай непредвиденных обстоятельств или пустились в плавание для выполнения своих непосредственных обязанностей. Совокупность всех трех популяций эритроцитов носит название – эритрон. В эритроне содержится от 25 х 1012/л (Тера/литр) до 30 х 1012/л красных кровяных клеток.

Норма эритроцитов в крови взрослых людей отличается по половому признаку, а у детей в зависимости от возраста. Таким образом:

  • Норма у женщин колеблется в пределах 3,8 – 4,5 х 1012/л, соответственно, гемоглобина у них тоже меньше;
  • Что для женщины является нормальным показателем, то у мужчин называется анемией легкой степени, поскольку нижняя и верхняя граница нормы эритроцитов у них заметно выше: 4,4 х 5,0 х 1012/л (то же самое касается и гемоглобина);
  • У детей до года концентрация эритроцитов постоянно меняется, поэтому для каждого месяца (у новорожденных – каждого дня) существует своя норма. И если вдруг в анализе крови повышены эритроциты у ребенка двух недель отроду до 6,6 х 1012/л, то это нельзя расценивать как патологию, просто у новорожденных такая норма (4,0 – 6,6 х 1012/л).
  • Некоторые колебания наблюдаются и после года жизни, но нормальные значения не особо отличаются от таковых у взрослых. У подростков 12 -13 лет содержание гемоглобина в эритроцитах и уровень самих эритроцитов соответствует норме взрослых людей.

Повышенное содержание эритроцитов в крови называется эритроцитозом, который бывает абсолютным (истинным) и перераспределительным. Перераспределительный эритроцитоз патологией не является и возникает, когда эритроциты в крови повышены при определенных обстоятельствах:

  1. Пребывание в горной местности;
  2. Активный физический труд и спорт;
  3. Психоэмоциональное возбуждение;
  4. Дегидратация (потеря организмом жидкости при диарее, рвоте и т. д.).

Высокие показатели содержания эритроцитов в крови являются признаком патологии и истинного эритроцитоза, если они стали результатом усиленного образования красных кровяных телец, вызванного неограниченной пролиферацией (размножением) клетки-предшественницы и ее дифференцировки в зрелые формы эритроцитов (эритремия).

Снижение концентрации красных клеток крови называют эритропенией. Она наблюдается при кровопотере, угнетении эритропоэза, распаде эритроцитов (гемолиз) под действием неблагоприятных факторов. Низкие эритроциты в крови и пониженное содержание Hb в эритроцитах является признаком анемии.

Современные гематологические анализаторы, помимо гемоглобина (HGB), пониженного или повышенного содержания эритроцитов в крови (RBC), гематокрита (HCT) и других привычных анализов, могут рассчитывать и другие показатели, которые обозначаются латинской аббревиатурой и бывают совсем не понятны читателю:

  • МСН – среднее содержание гемоглобина в эритроците, норма которого при исследовании в анализаторе 27 – 31 пг, можно сопоставить с цветовым показателем (ЦП), указывающим на степень насыщенности эритроцитов гемоглобином. ЦП рассчитывается по формуле, в норме он равен или больше 0,8, но не превышает 1. По цветному показателю определяют нормохромию (0,8 – 1), гипохромию эритроцитов (меньше 0,8), гиперхромию (больше 1). Для определения характера анемии МСН используется редко, его повышение больше говорит о гиперхромной мегалобластной анемии, которая сопутствует циррозу печени. Уменьшение значений МСН указывает на наличие гиперхромии эритроцитов, которая характерна для ЖДА (железодефицитая анемия) и неопластичяеских процессов.
  • МСНС (средняя концентрация гемоглобина в Er) коррелирует со средним объемом эритроцитов и средним содержанием гемоглобина в эритроцитах, рассчитывается из значений гемоглобина и гематокрита. МСНС снижается при гипохромных анемиях и талассемии.
  • MCV (средний объем эритроцитов) – очень важный показатель, определяющий тип анемии по характеристике красных кровяных телец (нормоциты – нормальные клетки, микроциты — лилипуты, макроциты и мегалоциты – гиганты). Кроме дифференцировки анемий, MCV используют для выявления нарушений водно-солевого баланса. Высокие значения показателя указывают на гипотонические нарушения в плазме, пониженные, наоборот, на гипертоническое состояние.
  • RDW — распределение эритроцитов по объему (анизоцитоз) указывает на гетерогенность популяции клеток и помогает дифференцировать анемии в зависимости от значений. Показатель распределения эритроцитов по объему (совместно с расчетом MCV) понижен при микроцитарных анемиях, но его следует изучать одновременно с гистограммой, которая тоже входит в функции современных аппаратов.

Кроме всех перечисленных достоинств эритроцитов, хочется отметить еще одно:

Эритроциты считают зеркалом, отражающим состояние многих органов. Своеобразным индикатором, способным «почувствовать» неполадки или позволяющим следить за течением патологического процесса, является скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Почему красные кровяные клетки так важны для диагностики многих патологических состояний? Их особая роль вытекает и формируется в силу уникальных возможностей, а чтобы читатель мог себе представить истинную значимость эритроцитов, попробуем перечислить их обязанности в организме.

Поистине, функциональные задачи красных кровяных клеток широки и многообразны:

  1. Они осуществляют транспортировку кислорода к тканям (с участием гемоглобина).
  2. Переносят углекислый газ (с участием, помимо гемоглобина, фермента карбоангидразы и ионообменника Cl- /HCO3).
  3. Выполняют защитную функцию, так как способны адсорбировать вредные вещества и переносить на своей поверхности антитела (иммуноглобулины), компоненты комплементарной системы, образованные иммунные комплексы (Ат-Аг), а также синтезировать антибактериальное вещество, называемое эритрином.
  4. Участвуют в обмене и регуляции водно-солевого равновесия.
  5. Обеспечивают питание тканей (эритроциты адсорбируют и переносят аминокислоты).
  6. Участвуют в поддержании информационных связей в организме за счет переноса макромолекул, которые эти связи обеспечивают (креаторная функция).
  7. Содержат тромбопластин, который выходит из клетки при разрушении эритроцитов, что является сигналом для системы свертывания начать гиперкоагуляцию и образование тромбов. Кроме тромбопластина, эритроциты несут гепарин, препятствующий тромбообразованию. Таким образом, активное участие эритроцитов в процессе свертывания крови – очевидно.
  8. Красные клетки крови способны подавлять высокую иммунореактивность (выполняют роль супрессоров), что может быть использовано в лечении различных опухолевых и аутоиммунных заболеваний.
  9. Участвуют в регуляции производства новых клеток (эритропоэз) путем освобождения из разрушенных старых эритроцитов эритропоэтических факторов.

Разрушаются красные кровяные тельца преимущественно в печени и селезенке с образованием продуктов распада (билирубин, железо). Кстати, если рассматривать каждую клетку по отдельности, то она будет не такой уж и красной, скорее, желтовато – красной. Скапливаясь в огромные миллионные массы, они, благодаря гемоглобину, в них находящемуся, становятся такими, как мы привыкли их видеть – насыщенно-красного цвета.

Шаг 2: после оплаты задайте свой вопрос в форму ниже ↓ Шаг 3: Вы можете дополнительно отблагодарить специалиста еще одним платежом на произвольную сумму ↑

Некоторые молекулы, которые поступают в организм извне или синтезируются внутри него, обладают полифункциональностью. Функции холестерина заключаются в активации стероидных гормонов, биосинтезе холекальциферола, пищеварении. Холестериновый обмен влияет на метаболизм всех клеток, органов и тканей организма. Всосавшись из желудочно-кишечного тракта или образовавшись в печени, молекулы холестерола, связанные с липопротеидными комплексами, поступают на следующие этапы биотрансформации. Выведение этих молекул также производится в составе липидов низкой и очень низкой плотности.

Строение холестерина изучает природоведческая наука биохимия. Формула его обозначается как С27Н46О. Это обозначает, что холестерол содержит 27 атомов углерода, и 46 — водорода.

Основа молекулы кристаллическая. В составе липидов высокой плотности она поступает из периферических тканей в печень. Здесь активируются фосфолипиды, производящие дальнейший биосинтез вещества. Примитивная схема дальнейшего метаболизма холестериновых молекул выглядит следующим образом:

  • Производные холестерола поступают в кровоток, где с ними происходит окисное гидроксилирование. В результате этого процесса отщепляется боковая углеводная цепь. Так формируются гормональные вещества.
  • Обмен холестерина в организме человека продолжается в виде синтеза холекальциферола. Этот витамин идет на построение опорно-двигательного аппарата человека.
  • Лишний холестерол, поступившей с животной пищей или чрезмерно синтезирующийся гепатоцитами, накапливается в сосудистых стенках. Это очень плохо для здоровья, поскольку в результате избытка холестериновых молекул формируются атеросклеротические бляшки.

Биологическая роль холестерина в организме человека следующая:

  • Гидролиз эфиров. Под ним подразумевается расщепление холестеринового вещества под воздействием фермента холестеролэстеразы. Обратное образование эфиров производится в просвете толстого кишечника под влиянием местной микрофлоры и ее энзимов.
  • Метаболизм. Холестерол принимает активное участие в обмене веществ, включаясь в биохимические процессы посредством встраивания в гормоны надпочечников или половых гонад. Среди его производных выделяют холекальциферол — витамин D, способный синтезироваться только под влиянием солнечного излучения.
  • Пищеварение. Холестерол выполняет расщепление сложных компонентов животной пищи до более простых для всасывания. Он выполняет в эту функцию в составе желчных кислот, пребывая в двенадцатиперстной кишке.

Значение холестерина в правильном функционировании иммунной системы бесценно. Он влияет на реакцию клеточного и гуморального звеньев иммунитета на химические и биологические агенты, атакующие клетки организма. Ученые Копенгагенского университета сделали открытие, что слишком высокая или критически низкая концентрация в крови липопротеидов высокой плотности ведет к иммунодефицитам. А вот баланс холестериновых структур помогает укрепить иммунную систему и сделать организм резистентным ко многим вирусными и бактериальным агентам.

Наиболее хорошо изучено влияние холестерина на сердечно-сосудистую систему. Низкий его уровень никак не отображается на функционировании сердца и сосудов. А вот высокий, наоборот, провоцирует закупорки артерий, вен и капилляров атеросклеротическими бляшками. Последние развиваются в интиме — внутренней выстилке сосудистых стенок. «Хороший» же холестерол помогает органам желудочно-кишечного тракта. Он включается в состав желчных кислот, вместе с ними поступая в желчь, вытекающую через Фатеров сосочек в двенадцатиперстную кишку, где производится переваривание жиров. Все эти процессы регулируются печенью, которая принимает главенствующую роль в холестериновом обмене.

Атеросклеротические процессы, поражают все органы и системы, включая головной мозг, коронарные сосуды сердца, почки, органы дыхания и кожные покровы. Поэтому знание функций холестерола позволяет проводить профилактику атерогенеза.

Еще одна важная роль холестерола в организме — его воздействие на нервную ткань. Он встраивается в клеточные оболочки нейронов, а также является основным функциональным компонентом миелиновой оболочки. Последняя играет роль муфты для нервных волокон и корешков. Именно благодаря ей импульсы от ядра клеток передаются ко всем участкам организма человека. Но повышенные концентрации холестероловых веществ часто приводят к тяжелой патологии — инсульту. Острое нарушение мозгового кровообращения характеризуется закупоркой какого-либо сосуда атеросклеротической бляшкой с дальнейшим омертвением участка коры головного мозга.

Обмен холестерина непосредственно связан со всеми метаболическими процессами в организме. Он затрагивает прежде всего эндокринную систему. Стероидные гормоны, синтезируемые надпочечниковыми железами, женскими и мужскими гонадами, содержат в себе холестерол. Поэтому последний играет роль стимулятора образования вторичных половых признаков у мальчиков и девочек, корректора уровня глюкозы в кровеносном русле, ингибитора некоторых ферментов, а также усилителя процессов синтеза и расщепления.

Химия утверждает, что холестериновые структуры содержатся в стенках всех клеток организма животных. Кроме холестерола, компонентом каждой клеточной мембраны является фосфолипид. Эта структура позволяет клетке функционировать, как открытая система, поглощающая необходимые вещества и выделяющая наружу продукты обмена. Холестероловые структуры в составе клетки интегрированы между цепями жирных кислот. Подобное строение мембран делает их прочными и способными регулировать ионный обмен.

Холестерин и его роль в жизнедеятельности организма
Холестерин – основной компонент клеточных мембран организма человека. Он существует как в свободной форме, так и в виде эфиров высших жирных кислот. В плазме крови приблизительно одна треть холестерина находится в свободном состоянии, а две трети представлены эфирами линолевой и олеиновой кислот. Внутриклеточно основной пул холестерина сформирован эфирами олеиновой, пальмитиновой и линолевой кислот. В организм это соединение поступает как из внешней среды (с пищей), так и синтезом de novo из ацетил-CoA [1].
Всасывание холестерина является сложным процессом, осуществляемым с помощью находящихся на мембранах энтероцитов тонкого кишечника специфических переносчиков. Основной из них – Niemann-Pick C1 like 1 protein (NPC1L1) [2]. У мышей, лишенных данного переносчика, наблюдалось снижение усвоения холестерина более чем на 90% [3]. Существуют также другие виды переносчиков, находящиеся на энтероцитах, такие как SR-BI, CD 36 или аминопептидаза N [4], но их точная роль до сих пор остается неясной. Эффективность всасывания холестерина составляет приблизительно 50–60% в зависимости от типа питания. В среднем за сутки усваивается около 250–500 мг данного соединения.
Человеческие клетки, не утратившие ядра, способны синтезировать холестерин de novo для внутриклеточных нужд. Холестерин, входящий в состав липопротеинов плазмы крови, образуется в печени и в дистальной части тонкого кишечника. Снижение содержания внутриклеточного холестерина приводит к активации регуляторных белков, ответственных за его синтез – LDL receptor protein, Niemann-Pick C1 protein (NPC1, крайне важен для внутриклеточного трафика холестерина) и ферментов (HMG-CoA синтетаза и редуктаза, сквален синтетаза). Ферментом, лимитирующим скорость синтеза холестерина, является HMG-CoA редуктаза [1]. Полный цикл биосинтеза составляет почти 200 ферментативных процессов, максимальный его уровень в здоровом организме варьируется в диапазоне 500–1000 мг в день.
Экзогенный холестерин является компонентом хиломикронов и в их составе попадает в печень. Печеночный пул холестерина состоит из холестерина хиломикронов и холестерина, синтезированного de novo. Далее холестерин экскретируется из печени в кровь в виде липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП). В сосудистом русле они трансформируются в липопротеины низкой плотности (ЛПНП), которые являются главным источником холестерина для многих тканей (особенно подверженных интенсивному делению и регенерации). Некоторые типы клеток (главным образом синтезирующие стероиды, гепатоциты) также способны извлекать эфиры холестерина из липопротеинов высокой плотности (ЛПВП), используя специфические рецепторы – SR-BI [5].
Перемещение холестерина из тканей организма в печень называют «обратным транспортом холестерина». Свободный холестерин экскретируется во внеклеточное пространство, где улавливается акцепторами, главным образом пре-ЛПВП, имеющими дискоидную форму, комплексами фосфолипидов/apoA-I. Холестерин, который связался с дисками фосфолипидов/apoA-I, является субстратом для действия фермента лецитин – холестеринацилтрансферазы (ЛХАТ). ЛХАТ переносит цепи жирных кислот от фосфатидилхолина к холестерину, формируя эфиры холестерина. Последние составляют гидрофобное ядро липопротеинов, формируя сферические частицы ЛПВП. В составе этих частиц холестерин транспортируется в печень и стероидсинтезирующие ткани.
Главный путь выведения холестерина из организма – формирование желчи. Холестерин является основным компонентом при образовании желчных кислот. Последние выполняют многочисленные физиологические функции: участвуют в переваривании и всасывании липидов в кишечнике, представляют собой конечный продукт катаболизма холестерина.

Читайте также:  Как избавиться от холестерина в сосудах головного мозга

Гиперхолестеринемия – фактор риска?
Наиболее спорным и противоречивым фактором риска сокращения продолжительности жизни в наши дни является гиперхолестеринемия. Необходимо ли снижать уровень общего холестерина ниже 5,2 ммоль/л? Существуют две диаметрально противоположные точки зрения. Согласно классической гипотезе концентрация в плазме крови общего холестерина или его фракций тесно связана с заболеваемостью и смертностью от ишемической болезни сердца (ИБС) и других последствий атеросклероза. Самый низкий уровень смертности от ИБС наблюдается при концентрации общего холестерина ниже 5,2 ммоль/л. При 5,3–6,5 ммоль/л регистрируются умеренное повышение летальных исходов от ИБС. Более высокие концентрации общего холестерина (свыше 7,8 ммоль/л) ассоциируются с ростом числа смертей. Однако существует мнение [6], что для оптимального функционирования иммунной системы уровень общего холестерина должен быть в пределах 6,0–6,5 ммоль/л. M. F.?Muldoon и соавт. [7] при обследовании здоровых мужчин (средний возраст 46 лет) выделили 2 группы: в первой средний уровень общего холестерина был 151 мг/дл (3,9 ммоль/л), во второй – 261 мг/дл (6,74 ммоль/л). У лиц с более низким содержанием холестерина было достоверно ниже количество лимфоцитов периферической крови, общих Т-лимфоцитов и CD8+ клеток (р

Столкнувшись с «плохим холестерином», иммунные клетки макрофаги запускают воспалительную реакцию, после чего начинают накапливать избыток холестерина в самих себе.

Атеросклеротические бляшки, возникающие на стенках сосудов, состоят не только из холестерина и других жиров – в них содержится довольно много иммунных клеток, нейтрофилов и макрофагов.

Как известно, одна из главных задач макрофагов – поглощение разнообразного клеточного мусора: мертвых клеток, обломков мембран, белковых агрегатов, избыток липидов. Однако, когда макрофаги пытаются избавить сосуды от избытка липидов, могут возникнуть проблемы.

У нас в крови плавает много липопротеинов, то есть комплексов липидов с белками-переносчиками; из этих липопротеинов всем хорошо знакомы ЛПВП (липопротеины высокой плотности) и ЛПНП (липопротеины низкой плотности). ЛПНП иногда называют «плохим» холестерином, так как чем их больше, тем выше риск атеросклероза. В норме ЛПНП просто перевозят липиды, которые нужны для разных текущих клеточных процессов. Угроза атеросклероза возникает, когда липопротеины низкой плотности получают некоторые химические модификации.

Макрофаги в стенках сосудов поглощают избыток липопротеинов, однако из-за модификаций они не могут их переварить. Из-за избытка липидов иммунные клетки становятся менее подвижными (в таком виде их называют пенистыми клетками), начинают выделять воспалительные сигналы и в итоге гибнут. В результате в атеросклеротическую бляшку, которая состоит из холестерина, соединительнотканных белков, кальция и пр., добавляются еще и больные переродившиеся макрофаги, не справляющиеся со своей работой, провоцирующие воспаление и накопление соединительной ткани.

О том, что воспалительная реакция и атеросклероз тесно связаны между собой, говорят уже сравнительно давно (о чем мы неоднократно упоминали), однако кое-что в их взаимосвязи остается неясным. В частности, до сих пор было непонятно, как именно всё-таки из макрофагов получаются пенистые клетки. Отчасти ответ на этот вопрос дают исследования сотрудников НИИ общей патологии и патофизиологии, НИИ физико-химической медицины Росздрава, компании «Биософт» и их коллег из других научных центров России, США, Германии и Японии.

Очевидно, что у пенистых клеток некоторые гены должны работать иначе, чем у макрофагов. В экспериментах иммунным клеткам скармливали модифицированные липопротеины, из-за которых в макрофагах накапливается холестерин. В ответ на такие атерогенные липопротеины в клетках менялась активность десяти генов – однако ни один из них не участвовал в метаболизме холестерина.

С другой стороны, семь из десяти генов имели прямое отношение к воспалению. Иными словами, «плохие» липопротеины сначала включают в иммунных клетках воспаление, а потом уже иммунные клетки начинают накапливать в себе липиды, и далее уже разворачиваются прочие атеросклеротические процессы. Подробно результаты исследований опубликованы в журналах Atherosclerosis и Current Pharmaceutical Design.

Полученные результаты лишний раз говорят о том, насколько важны воспалительные процессы в развитии атеросклероза – а это значит, что если мы хотим с ним эффективно бороться, мы должны думать не только о холестерине, не только об обмене веществ, но и об иммунитете.

Работа выполнена при поддержке Российского научного фонда (РНФ).

По материалам пресс-службы РНФ.

Источник: Наука и жизнь (nkj.ru)

Хронический психологический стресс повышает активность воспалительных иммунных клеток, которые, не найдя в организме никаких инфекций, начинают формировать в сосудах атеросклеротические бляшки.

Липид-свободный аполипопротеин A-I снижает прогрессирование атеросклероза за счет мобилизации холестерина микродомена и ослабления количества клеток, выражающих CD131: мониторинг гомеостаза холестерина с использованием сотового эфира и общего соотношения холестерина

Атеросклероз — хроническое воспалительное заболевание, развитие которого обратно коррелирует с концентрацией липопротеинов высокой плотности. Текущая терапия включает фармацевтические препараты, которые значительно повышают концентрацию холестерина в липопротеине высокой плотности плазмы. Наши исследования проводились для исследования влияния низкодозного липидного аполипопротеина A-I (apoA-I) на хроническое воспаление. Цель этих исследований заключалась в том, чтобы определить, как подкожно вводимый липид-свободный apoA-I уменьшает накопление липидных и иммунных клеток в корне аорты гиперхолестеринемических мышей без постоянных возвышений в концентрациях холестерина липопротеинов высокой плотности плазмы.

LDLr
— / — и Ldlr
— / —
апоА-I
— / — мышей кормили западной диетой в общей сложности 12 недель. Через 6 недель подмножество мышей из каждой группы получало подкожные инъекции 200 мкг липидоподобного человека apoA-I 3 раза в неделю, тогда как другое подмножество получало 200 мкг альбумина в качестве контроля. У мышей, получавших липид-свободный apoA-I, наблюдалось снижение отложения холестерина и удержания иммунных клеток в корне аорты по сравнению с мышами, обработанными альбумином, независимо от генотипа. Это снижение атеросклероза, по-видимому, напрямую связано с уменьшением количества клеток, экспрессирующих CD131, и этерифицированного холестерина до общего содержания холестерина в нескольких отделениях иммунных клеток. Кроме того, обработка apoA-I изменяет микродоменную композицию холестерина, которая смещает CD131, общую β-субъединицу рецептора интерлейкина-3, от липидного плота до нетранфальных фракций плазматической мембраны.

Лечение ApoA-I уменьшало накопление липидов и иммунных клеток в корне аорты путем системного снижения содержания холестерина в микродоменах в иммунных клетках. Эти данные свидетельствуют о том, что без апоптоза липидов apoA-I опосредует благоприятные эффекты за счет ослабления содержания холестерина липидного плода иммунной клетки, что влияет на многочисленные типы путей передачи сигналов, которые полагаются на целостность микродоменов для сборки и активации.

Атеросклероз — хроническое воспалительное заболевание, характеризующееся накоплением холестерина в иммунных клетках, расположенных в стенке артерии. Несколько десятилетий наблюдательных исследований показали, что концентрация холестерина липопротеинов высокой плотности плазмы (HDL) (HDL-C) обратно связана с риском инфаркта миокарда (ИМ) 1, стимулируя убеждение, что фармакотерапия, направленная на повышение концентрации HDL в плазме, может предотвратить или уменьшить частоту ИМ.2 В последнее время исследование с использованием менделевских рандомизационных анализов показало, что генетическая оценка, полученная из 14 вариантов, которые, как известно, изменяют концентрацию ЛПВП, не выявила статистической связи с ИМ.3. Это исследование ставит под сомнение установленный взгляд на плазменный ЛПВП -C в качестве биомаркера, так как было безоговорочно принято, что повышение концентрации в плазме будет напрямую переходить на снижение показателей ИМ. Хотя это исследование подчеркивает потенциальные ограничения использования концентрации HDL-C в плазме в качестве суррогатной меры для риска ИМ, его собственные ограничения включают подходящие генетические варианты, достоверный генотип для оценок заболеваний и возможность плейотропного воздействия интересующих генетических вариантов. Сочетание этого исследования с многочисленными сообщениями, в которых описывается общее отсутствие эффективности препаратов, которые повышают уровень ЛПВП путем ингибирования движения холестерилового эфира (СЕ) из HDL4, способствовало появлению ряда новых идей для объяснения защитных свойств ЛПВП. Эти концепции основаны на гипотезе о том, что не все частицы, содержащие плазменный HDL, создаются равными, а также то, что общая концентрация HDL-C во всех случаях отражает число частиц HDL.5, 6, 7, 8. Для решения этих концепций термин HDL частица заменила концентрацию HDL-C. Со временем эти идеи будут тщательно протестированы и оценены, чтобы определить, обеспечивают ли они более надежный биомаркер для прогнозирования риска MI9, 10, 11, 12, 13, чем концентрации плазменных HDL-C.

Функциональность HDL легко следует из недавних исследований, показывающих, что HDL плазмы может стимулировать удаление холестерина в клетках и называется пропускной способностью холестерина. Эти исследования показывают, что плазменный HDL человека стимулирует удаление холестерина из клеток и что скорость удаления является лучшей прогностической мерой риска ИМ, чем общая концентрация HDL-C.14, 15, 16, 17 Поскольку большинство (≈98%) Частицы HDL в плазме обогащены холестерином, не совсем ясно, какая фракция (и) отвечает за вытеснение холестерина из стенок артерий. Большинство исследований показывают, что ABCA1 наиболее эффективно выводит холестерин в белок или липид-бедный аполипопротеин A-I (apoA-I); однако только ≈2% плазменного HDL можно считать липид-белым, 18, 19, оставляя менее адекватное объяснение того, как apoA-I, липид-бедный, образуется на стенке артерии. Возможно, что, поскольку плазменные частицы HDL очень гетерогенны, они участвуют в динамических процессах и реконструируются на стенке артерии.13, 20, 21, 22, 23 Известно, что различные молекулы, переносимые плазменным HDL, влияют на развитие атеросклероз и холестерин, несомненно, один, если не самый важный. Таким образом, когда частицы ЛПВП являются функциональными, они удаляют избыточный артериальный холестерин, который в конечном итоге переносится в печень для экскреции, завершая обратный путь переноса холестерина. Реверсивный перенос холестерина в значительной степени зависит от уникальных свойств apoA-I, основного белкового компонента плазменного HDL. ApoA-I широко изучен и, как известно, обладает структурными свойствами, которые позволяют ему эффективно упаковывать большие количества холестерина24, 25 через его взаимодействие с ABCA126, 27 на поверхности клетки.

Был предпринят ряд различных подходов на обеих моделях животных, а у людей — применение apoA-I в качестве терапевтического агента. Эти исследования направлены на снижение накопления артериального холестерина путем вливания гомологичного HDL28 или липидного HDL 29, в то время как в большинстве исследований основное внимание уделялось введению рекомбинантного HDL, стабильного комплекса фосфолипидов и apoA-I.30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 В целом, HDL-направленная терапия представляется многообещающей, но она продолжает полагаться на концепцию, согласно которой повышение концентрации HDL в плазме согласуется с эффективностью, несмотря на осложнения, возникающие в результате инфузии больших количеств фосфолипида, восстановленного с apoA-I.40

В предыдущих исследованиях нашей лаборатории основное внимание было уделено применению липидоподобного человеческого apoA-I для отмены аутоиммуноподобного фенотипа, который развивается в рецепторе липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) с диетическим питанием, apoA-I (Ldlr
— / —
апоА-I
— / -) двойные нокаутные мыши.41, 42, 43, 44, 45 В этих условиях концентрации плазменного HDL-C не были заметно увеличены после инъекции, но значительное снижение избыточного клеточного холестерина, а также значительные изменения в регуляторной T- число клеток было зарегистрировано.42, 44 В текущих исследованиях мы попытались изучить механистическую основу, объясняющую кажущиеся защитные эффекты подкожно вводимого лечения с низкой дозой apoA-I без увеличения концентрации HDL-C.

LDLr
— / — и Ldlr
— / —
апоА-I
— / — самцы мышей41 были поставлены на западную диету (42% калорий из жира, 0,2% калорий из холестерина) (Envigo-Teklad, #TD 88137) в возрасте 4 недель. Во время вскрытия мышей голодали в течение 3 часов до анестезии с помощью кетамина / ксилазина. Эвтаназия и сбор крови осуществлялись путем сердечной пункции. Числа определенного генотипа, используемые для каждого исследования / анализа, указаны в каждой из легенд. Все мыши выращивали и размещали в клетках микроизолятора в помещении, свободном от патогенов, в Медицинском колледже штата Висконсин (MCW). Все эксперименты проводились в соответствии с рекомендациями Комитета по уходу и использованию животных MCW, а одобрение использования грызунов было получено из MCW в соответствии с критериями, изложенными в Руководстве по уходу и использованию лабораторных животных из национальных институтов здоровья.

Человеческую плазму apoA-I очищали, как описано ранее.42, 44, 46 Человеческий ЛПНП для использования в экспериментах по культуре ткани, побочный продукт от выделения человеческого apoA-I, диализовали и затем фильтровали через 45 мкм центрифужные фильтры Spin-X (Costar) и хранить при температуре 4 ° C. Группы мышей из каждого генотипа получали либо 200 мкг липид-свободного апоА-I, либо 200 мкг бычьего сывороточного альбумина (BSA, Sigma, St. Louis, MO). Оба препарата были приготовлены при той же концентрации, и фильтр стерилизовали. После кормления мышей западной диетой в течение 6 недель они вводились подкожно 3 раза в неделю в течение 6 недель либо с помощью BSA, либо с apoA-I, все еще потребляя западную диету.

Кровь собирали в пробирках, содержащих ЭДТА, затем центрифугировали при 2000 г в течение 10 минут при 4 ° С. Общий плазменный холестерин (TPC) и HDL-C определяли с использованием набора для ферментативного анализа (Wako Diagnostics Holesterol E) после разделения класса липопротеинов на колонке Superose 6 10 / 300GL (GE Healthcare), как описано ранее.47 Человеческий apoA-I в мышь плазмы определяли с использованием набора Abcam человеческого ApoA-I ELISA.

Во время жертвоприношения в левый желудочек вставляли иглу бабочки 21G, атриум был обрезан, сердце и аорту перфузировали солевым раствором в течение 5 минут, а затем сердце удаляли и очищали от жира и адвентиции. Мышиное сердце и аорта были встроены в оптимальную среду для срезания, а затем секцию для окрашивания и иммуногистохимии. Для количественного определения общей и процентной площади поражения оптимальные режущие кромки с аортами разрезали на последовательные 6-мкм секции с использованием криостата Leica при -50 ° C. Тканевые участки окрашивали в 0,5% масла Red O (ORO), растворенного в пропиленгликоле в течение ночи, затем выдерживали гемотоксилином. Массонское трихромное пятно использовалось для оценки содержания соединительной ткани в корне аорты. Количественное определение окрашивания проводили после оцифровки разделов с использованием микроскопа Nikon и программного обеспечения Image-Pro Plus 6.2 и определяли количественно с использованием программного обеспечения NIS Elements (Nikon Instruments Inc). Для морфологических анализов использовалось от восьми до 10 секций с интервалом 30 мкм и усреднялось для получения значения для каждого животного. Результаты выражаются как как процент площади поражения, так и область абсолютного поражения, как описано ранее.47

Читайте также:  В каких продуктов имеется холестерин

Для иммунофлуоресцентной микроскопии в качестве первичного антитела использовали очищенный крысиный анти-мышиный CD68 (AbD FA-11-Serotec) при разведении 1: 100. Слайды инкубировали в течение 1 часа в PBS, содержащем 2% фетальной телячьей сыворотки, промывали PBS и затем инкубировали с 1: 300 разведением Cy3-конъюгированного козьего анти-крысиного IgG-антитела (Rockland) в течение 30 минут при комнатной температуре. После кратковременного промывания слайдов с помощью PBS они были окрашены DAPI для визуализации ядер, а затем смонтированы с помощью Fluoro-Gel (Electron Microscopy Sciences). Иммунофлуоресценцию визуализировали с использованием микроскопа Nikon Eclipse TE2000-S, и общее количество процентов CD68-окрашивания определяли количественно с использованием программного обеспечения Nikon Elements, как описано ранее.47

Целую кровь (≈800 мкл) собирали с помощью сердечной пункции с использованием гепаринизированного шприца и помещали в 15-мл пробирку, содержащую 5 мкл 100 ммоль / л ЭДТА, и затем смешивали для предотвращения коагуляции. К этой пробирке добавили 10 мл предварительно обработанного буфера ACK (Lonza), тщательно перемешанного путем инверсии и давшего сидеть на льду в течение 5 минут. Образец центрифугировали в течение 5 минут при 2000 об / мин в роторе вращающегося ведра при 10 ° C. После спина весь супернатант удаляли, мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) ресуспендировали в 1 мл PBS с pH 7,4 без Ca2 + и Mg2 +, переносили в 1,5-мл пробирку и затем центрифугировали при 2000 об / мин в течение 5 минут при 4 ° С. Осадок промывали 1 или 2 раза PBS для удаления остаточных тромбоцитов и РВМС ресуспендировали, а затем подсчитывали перед FACS.

Мышечную селезенку и клетки костного мозга пропускали через 40 мкм клеточный фильтр, промывали ледяным PBS и затем лизировали один раз холодным буфером для лизиса ACK, как описано для PBMC. Аорты были эксплантированы после перфузии с помощью ФСБ с ледяной складкой, очищены и переварены ДНКазой I, коллагеназой типа I, коллагеназой типа XI и гиалуронидазой типа I, как описано ранее.48 Все протоколы окрашивания были проведены в течение 30 минут на льду. Антитела были приобретены у eBioscience (CD115), Biolegend (lin [lineage]) и BD Bioscience (TCRb, CD11b, CD131, GR-1, Ly6C, Ly6G, CD45, CD11c, F4 / 80, CD117 [c-kit], Ly-6A / E [sca-1]). Anti-Mouse Ig, k / Отрицательные и положительные контрольные бусины были приобретены у BD Bioscience. Образцы окрашивали красителем LIVE / DEAD (Life Technologies). Образцы были получены на LSRII (BD Bioscience), и данные были проанализированы с использованием программного обеспечения FlowJo X 10.0.7r2 (FlowJo, LLC, Ashland, OR).

Периферические клетки крови и плазму были выделены из крови 56 здоровых доноров, которые были частью программы Take Off Pounds Sensibly (TOPS Club, Inc). Все процедуры были одобрены институциональной комиссией MCW и соответствовали соответствующим этическим принципам исследований человека. Каждый участник получал информированное согласие. Критерии для участников, набранных для членства в TOPS Club, Inc, были описаны ранее.49, 50 Семьи с не менее чем двумя сыновьями, страдающими ожирением (индекс массы тела ≥30 кг / м2) и, по крайней мере, 1 неполный родственник и / или родитель (масса тела индекс ≤27 кг / м2) из ​​Висконсина, Иллинойса, Кентукки и Западной Вирджинии были приглашены для участия в исследовании. Участие было добровольным. Пациенты с историей сахарного диабета 1-го типа, рака, почечной или печеночной болезни, активной болезни коронарных артерий, злоупотребления психоактивными веществами, кортикостероидов, препаратов щитовидной железы выше заместительной дозы (для зоба или рака щитовидной железы) или истории потери веса больше, чем 10% массы тела за предыдущие 12 месяцев были исключены из исследования. Все процедуры были одобрены институциональной комиссией MCW и соответствовали соответствующим этическим принципам исследований человека. Информированное согласие было предоставлено каждым участником (как для вопросников, так и для фактического исследования). Кровь втягивали в трубки Vacutainer EDTA (BD Bioscience), центрифугировали, а верхний слой плазмы собирали и замораживали при -80 ° C до анализа. Образцы талой плазмы анализировали на общий уровень холестерина (ТС). LDL и HDL холестерин определяли после осаждения с помощью MgCl2
51 с использованием наборов холестерина от Roche-Boehringer (Индианаполис, IN). РВМС были выделены из истощенной плазмой крови с помощью Ficoll-Paque PLUS (GE Healthcare). РВМС промывали для удаления тромбоцитов, затем хранили в среде FBS, содержащей 10% диметилсульфоксида.

Целую кровь (≈800 мкл) собирали путем сердечной пункции с использованием гепаринизированного шприца и помещали в 15-мл пробирку, содержащую 5 мкл 100 ммоль / л ЭДТА, затем смешивали для предотвращения коагуляции. К этой пробирке добавили 10 мл предварительно обработанного буфера ACK (Lonza), тщательно перемешанного путем инверсии и давшего сидеть на льду в течение 5 минут. Образец центрифугировали в течение 5 минут при 2000 г в роторе вращающегося ведра при 10 ° C. После спина весь супернатант удаляли, РВМС ресуспендировали в 1 мл PBS, рН 7,4, переносили в пробирку объемом 1,5 мл и затем центрифугировали при 2000 г в течение 5 минут при 4 ° С. Осадок клеток промывали 1 или 2 раза с помощью PBS для удаления остаточных тромбоцитов, и РВМС снова ресуспендировали, а затем подсчитывали перед инкубацией 3 × 105 клеток с указанным количеством ЛПНП или ЛПВП при 37 ° С, 5% СО2, в 1 мл конечного объема свободной от сыворотки среды RPMI. После инкубации в течение от 30 минут до 6 часов клетки интенсивно промывали PBS для удаления остаточных липопротеинов центрифугированием при 2000 g в течение 5 минут, затем хранили при -80 ° C.

Колбы T75 клеток J774 культивировали в RPMI с 10% FBS до конфлюэнта. Клетки поднимали с использованием Versene (Lonza), затем высевали в 12-луночные планшеты с плотностью 7 × 105 клеток на лунку. На следующий день сливные лунки промывали 2 или 3 раза PBS, а затем человеческий LDL-белок в RPMI добавляли в концентрации от 20 до 150 мкг / мл на лунку. Клетки инкубировали в течение 2-3 дней с человеческим ЛПНП при 37 ° С, 5% СО2, промывали 3 раза без сыворотки RPMI и затем инкубировали с конечной концентрацией белка с 40 мкг / мл липидного свободного апоа- I или BSA в одночасье. На следующий день среду удаляли и клетки промывали PBS, затем поднимали с помощью Versene. Клеточные гранулы центрифугировали, промывали, а затем ресуспендировали и подсчитывали. Лоури-анализ 52 проводили на аликвотах экстракта для концентрации белка, а оставшиеся клетки использовали непосредственно для выделения липидных плотов или использовали для приготовления белковых экстрактов, используемых в западных анализах.

Субклеточные фракции готовили из свежесобранных гранул клеток J774, объединенных из 15 — 100 мм посуды для каждой обработки. Клетки промывали до сбора 10 ммоль / л Tris pH 8, затем высвобождали из пластины с использованием Versene (Lonza). Объединенные клеточные гранулы для каждой группы обработки были взяты в 900 мкл неочищенного лизис-буфера, содержащего ингибиторы протеазы (10 ммоль / л Tris, pH 8, 1 ммоль / л MgCl2, 1 ммоль / л PMSF, 1 ммоль / л Na3VO4 , 5 ммоль / л NaF) и пропускали через иглу шприца 23G, по меньшей мере, в 20-40 раз. Клеточный лизат центрифугировали в течение 5 минут при 1000 г при 4 ° С для получения постнуклеарного супернатанта (ПНС). Послеядерный супернатант доводили до 1,6 мл буфером для лизиса, из которого 0,1 мл сохраняли, а оставшиеся 1,5 мл смешивали с 3,3 мл 65% сахарозы, растворенной в 10 ммоль / л Трис, pH 8, с получением 45% раствора сахарозы (плотность = 1202,5 ​​кг / м3), а затем переносили в центрифужную пробирку. Наверху 45% раствора сахарозы тщательно накладывали 4,8 мл 35% -ного раствора сахарозы (d = 1390,2 кг / м3), затем 2,4 мл 5% -ного раствора сахарозы (d = 1340,3 кг / м3). Образцы вращали в течение ночи при 40 000 об / мин в роторе Beckman SW40, поддерживаемом при 15 ° C. На следующий день каждую пробирку фракционировали в 8 или 9 последовательных фракций с использованием автоматической пробоотборной системы FluorInert (Sigma) с постоянной скоростью. Фракции немедленно замораживали и хранили при -80 ° С до анализа.

Вестерн-блот проводили после полной изоляции белка после экстракции с использованием RIPA-буфера (Cell Signaling Technologies), как описано47, или с использованием фракций липидного плота, не содержащих моющих средств. Все блоты запускали после разделения на 12% SDS-PAGE. Аликвоты белка разбавляли 4X LDS-буфером (Novex), к которому добавляли DTT для достижения конечной концентрации 100 ммоль / л. Образцы нагревали до 70 ° С в течение 20 минут. Перенос на PVDF-мембрану (Perkin-Elmer) осуществляли после обработки буфером Tris-glycine pH 8,3, используя аппарат полусухой блот (BioRad), работающий в течение 30 минут при 10 В. Мембраны блокировали 5% обезжиренным сухим молоком в 10 ммоль / л Трис-глицина, pH 7,4 буфера и обрабатывали. Мембрану инкубировали с первичными антителами, флотиллином (BD Biosciences), тубулином (Abcam) и интерлейкином (IL) -3Rb (Santa Curz), в течение ночи при 4 ° C. Блоты промывали и затем инкубировали с HRP-конъюгированным антителом против мышиного или кроличьего IgG (GE Healthcare) при разведении 1: 5000 в течение 1 часа при комнатной температуре. Клетки снова промывали и затем инкубировали с субмикронным субмикронным субстратом (Пирс). Блоты подвергались воздействию рентгеновской пленки (MidSci), а интенсивности определяли количественно с использованием программного обеспечения Image J.

Определение TC и свободного холестерина (FC) проводили на клеточных экстрактах или фракциях из изолятов липидного плота, которые были добавлены с помощью внутреннего стандарта, холестерина-3,4-13C2 (Sigma-Aldrich) и подвергали экстракции липидов, как ранее описанной.44 Для измерения FC аликвоту удаляли, выпаривали в атмосфере аргона, растворяли в гексане и затем вводили на тандемный масс-спектрометр Thermo Scientific TSQ 8000, соединенный с газовым хроматографом Trace 1310 (GC / MS / MS), оснащенным Triplus RSH автоинъектор. В режиме положительного иона использовались следующие параметры: время сканирования 0,1 с, энергия столкновения 10 В, эмиссионный ток 25 мкА, энергия электронов 42 эВ, температура источника и линии передачи 280 ° С и скорость потока = 2,5 Э-8 м3 / s. Анализ проводили с использованием колонны TG-SQC (15 м × 0,25 мм ID) с толщиной пленки 0,25 мкм. Для количественного определения ТК оставшийся образец сушили под потоком азота, повторно растворяли в 1 мл этанола, смешивали с 100 мкл 50% (мас. / Мас.) Водного раствора гидроксида калия и затем омывали в течение 1 часа при 65 ° С. После экстракции ТС измеряли, а СЕ рассчитывали как разность между ФК и ТК. Содержание фосфолипидов определяли на фракциях плота, как описано ранее.27, 53

GraphPad Prism версия 5 использовалась для статистического анализа, и данные сообщаются как среднее ± SD. Различия между группами оценивались независимыми t-тестами и ANOVA с пост-hoc-тестом Tukey.

Предыдущие исследования из нашей лаборатории были сосредоточены на выяснении механизма (механизмов), ответственных за атерозащитные свойства ЛПВП apoA-I. В этих исследованиях мы впервые использовали подкожные (SC) инъекции 500 мкг липидного свободного apoA-I для лечения диетического корма Ldlr
— / —
апоА-I
— / — мышей и реверсировали симптомы, связанные с аутоиммунным фенотипом, развивающимся у мышей, которым кормили западную диету.41, 43 В этих исследованиях инъекции BSA, нерелевантного белка, при той же концентрации не уменьшали или не подавляли нагрузку на холестерин и последующие аутоиммунные фенотип.44 Несмотря на отмену отложения холестерина в коже и слизистых лимфатических узлах, диетпитание Ldlr
— / —
апоА-I
— / — мышечная плазма показала лишь небольшое переходное увеличение концентрации ЛПВП или апоА-I в течение 3-4 часов после инъекции.44 Взятые вместе, эти наблюдения показали, что apoA-I, поставленный в небольших последовательных количествах, предотвращает и / или регрессирует липид осаждение в периферических тканях без устойчивого повышения концентрации ЛПВП в плазме или апоА-I. Однако этот вывод, по-видимому, несовместим с современным восприятием плазменного HDL в качестве терапевтического средства, поскольку считается, что эффективность снижения атеросклероза лучше всего достигается при повышении концентрации HDL-C.

Конструкция текущего исследования проиллюстрирована на рисунке 1A. Группы возрастных мужчин Ldlr
— / — и Ldlr
— / —
апоА-I
— / — мышей кормили западной диетой в общей сложности 12 недель. Начиная с 6 недель рациона, группа (n = 10) из каждого генотипа начала получать инъекции 200 мкг липид-свободного человеческого apoA-I (≈4 мг / кг) 3 раза в неделю в течение оставшейся части 12 недель изучение. Другая группа, представляющая контрольную группу, прошла тот же режим лечения, но получила 200 мкг БСА вместо апоА-I. В предыдущем исследовании мы обнаружили, что ≈10% не содержащего липидов apoA-I, которое было подкожно введено, достигло плазменного отделения, достигнув пика ≈3 — 4 часа после инъекции и проживало на плазменных HDL-частицах.44 Мы снова исследовали время конечно появление человеческого apoA-I в плазме после SC инъекции липидного свободного apoA-I в диетическом корме Ldlr
— / — мышей, как показано на рисунке S1. Эти данные показывают, что появляется ≈6% -8% от введенного человеческого apoA-I и пики в плазме через 3,5 часа после инъекции SC. Затем мы рассмотрели влияние этого небольшого количества липидов, свободных от apoA-I, на концентрации TPC и HDL-C. На фигурах 1В и 1С показаны концентрации TPC и HDL-C для каждого генотипа и группы лечения, соответственно, и предполагает, что ни концентрации TPC, ни HDL-C не были значительно увеличены обработкой apoA-I или BSA в ходе исследования , как сообщалось ранее.44 На рис. 1D также показано, что отношение эстерифицированного холестерина (EC) к TC в плазме было сходным между группами, что указывает на то, что активность LCAT в сыворотке и / или скорость конверсии FC-EC не были затронуты apoA-I или BSA.24 Следует отметить, что концентрации холестерина в плазме в диетическом корме Ldlr
— / —
апоА-I
— / — средняя мышь ≈600 мг / дл, что почти вдвое меньше, чем у Ldlr
— / — мышей (1200 мг / дл). Интересно, что это различие во многом объясняется различиями в очень холестерине ЛПНП и ЛПНП.41 Механизм (ы) за этим генотип-специфическим ответом на потребление западной диеты остается неясным, но, по-видимому, включает аспекты аутоиммунного фенотипа, связанные с глубоким нарушением в гомеостазе холестерина.41, 43

источник